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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  PCR試劑盒  >  PCR檢測試劑盒  >  50次馬立克氏病病毒型PCR檢測試劑盒說明書

馬立克氏病病毒型PCR檢測試劑盒說明書

簡要描述:馬立克氏病病毒型PCR檢測試劑盒說明書上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:磷酸化N-鈣粘附分子抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-CDH2 (Tyr820)

周期素依賴性激酶樣5抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:CDKL5

尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:CDX1

  • 產(chǎn)品型號:50次
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-17
  • 訪  問  量:362

詳細(xì)介紹

原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;

注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

 馬立克氏病病毒型PCR檢測試劑盒說明書

 Marek's Disease Virus(MDV)3PCR

BK-P9376

?
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)原理:
 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。

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馬立克氏病病毒型PCR檢測試劑盒說明書骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml  英文名稱:BMP4

β晶體蛋白B1抗體 規(guī)格: 0.2ml  英文名稱:beta B1 Crystallin

Bcl2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 規(guī)格: 0.1ml  英文名稱:BCLAF1

磷酸化原癌基因c-kit抗體 規(guī)格: 0.1ml  英文名稱:phospho-c-Kit(Tyr568 + Tyr570)

CD161抗體 規(guī)格: 0.1ml  英文名稱:CD161

畸胎瘤衍化生長因子單克隆抗體(C端) 規(guī)格: 0.1ml  英文名稱:CRIPTO

趨化素樣因子超家族成員3抗體 規(guī)格: 0.2ml  英文名稱:CKLFH3

細(xì)胞色素c氧化酶VIIA亞型2抗體 規(guī)格: 0.1ml  英文名稱:COX7A2

周期素C抗體 規(guī)格: 0.1ml  英文名稱:Cyclin C

末端補(bǔ)體復(fù)合物抗體 規(guī)格: 0.2ml  英文名稱:C5b-9

7號染色體開放閱讀框53抗體 規(guī)格: 0.2ml  英文名稱:C7orf53

3號染色體開放閱讀框58抗體 規(guī)格: 0.2ml  英文名稱:C3orf58

磷酸化N-鈣粘附分子抗體 規(guī)格: 0.1ml  英文名稱:phospho-CDH2 (Tyr820)

周期素依賴性激酶樣5抗體 規(guī)格: 0.2ml  英文名稱:CDKL5

尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml  英文名稱:CDX1

 

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