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反芻獸曼氏桿菌PCR檢測試劑盒廠家

簡要描述:反芻獸曼氏桿菌PCR檢測試劑盒廠家上海帛科生物相關產品:兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

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  • 產品型號:50次
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-17
  • 訪  問  量:369

詳細介紹

注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

產品名稱

英文名稱

貨號

 反芻獸曼氏桿菌PCR檢測試劑盒廠家

 Mannheimia ruminalisPCR

BK-P9373

原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環(huán)擴增,擴增產物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
?
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

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兔子Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

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反芻獸曼氏桿菌PCR檢測試劑盒廠家人膠原吡啶交聯(lián) 96TPYD(Human Pyridinoline crosslinks) ELISA Kit

人內皮脂肪酶 96TEL(Human Endothelial lipase) ELISA Kit

人多聚ADP核糖聚合酶 96TPARP(Human Poly ADP ribose polymerase) ELISA Kit

β葡萄糖醛酸苷酶 96TBetaGD(Human Beta-glucuronidase) ELISA Kit

人顆粒酶A 96TGzms-A(Human granzymes A) ELISA Kit

人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型 96TAgtr I a(Human angiotensin II receptor type I a) ELISA Kit

人干擾素活化基因205 96TIfi205(Human interferon activated gene 205) ELISA Kit

人高香草酸 96T人高香草酸(HVA) ELISA Kit

人雄激素結合蛋白 96TABP(Human Androgen Binding Protein) ELISA Kit

人細胞膜表面免疫球蛋白 96TSmIg(Human Surface Membrane Immunoglobulin) ELISA Kit

人抗凝血酶Ⅲ抗體 96THuman Anti-Thrombin III ,AT- III ELISA Kit

人切除修復交叉互補基因1 96Thuman excision repair cross-complementation group 1,ERCC1 ELISA kit

人殺菌性/通透性增加蛋白 96THuman bactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI ELISA Kit

30%丙烯酰胺 100ml30%Acrylamide

蛋白抽提試劑盒-II (液體樣品蛋白抽提和回收) 50次提取

技術原理:
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。

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