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一文快速了解探針法PCR檢測試劑盒

更新時(shí)間:2021-11-10      點(diǎn)擊次數(shù):435
       關(guān)于探針法PCR檢測試劑盒,你的了解有多少呢?小編來帶你了解一下
  本試劑盒采用探針法實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),設(shè)計(jì)一對(duì)EB病毒特異性引物,結(jié)合一條特異性探針,用熒光PCR技術(shù)對(duì)EB病毒的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測,用于臨床上對(duì)病原學(xué)輔助診斷。
  1DNA提取
  1)對(duì)上述處理好的標(biāo)本加入等體積核酸提取液(固體標(biāo)本加入50μL核酸提取液),100℃恒溫處理10min,13,000rpm離心5min,取上清液轉(zhuǎn)移至新的1.5mLEP管,-20℃保存;
  2)DNA的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(離心柱提取法),請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。
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  2.探針法PCR檢測試劑盒檢測方法的局限性
  a.樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);
  b.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
  c.陽性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽性結(jié)果;
  d.病原體在流行過程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
  f.試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果;
  g.本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。
  結(jié)果判斷
  陽性:檢測通道Ct值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。
  可疑:檢測通道Ct值>35.0,且出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn),重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)Ct值≤35.0和典型擴(kuò)增曲線者為陽性,否則為陰性。
  陰性:樣本檢測結(jié)果無Ct值且無明顯的擴(kuò)增曲線。

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