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豬白介素elisa試劑盒的實驗原理和注意事項

更新時間:2021-05-25      點擊次數:1342
  豬白介素elisa試劑盒具有穩定的重復性,吸附性能好,空白值低,并適用于血清血漿組織勻漿等多種樣本類型的檢測,方法簡單,操作方便,節省了實驗經費。
  實驗原理
  用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
  實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測豬白介素elisa試劑盒都應該做標準曲線,如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
  注意事項
  1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。
  2. 洗滌過程很重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
  3. 一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用加樣。
  4. 請每次測定的同時做標準曲線,建議做復孔。
  5. 如標本中待測物質含量高,請先稀釋后再測定,計算時請后面乘以稀釋倍數。
  6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
  7. 底物請避光保存。
  8. 不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

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