亚洲一区爱区精品无码-久久午夜夜伦鲁鲁片免费无码影视-av无码小缝喷白浆在线观看-亚洲成av人片无码不卡播放器-亚洲成在人线av

咨詢熱線

13564080845

當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  海藻糖酶(TREH)真核蛋白操作步驟

海藻糖酶(TREH)真核蛋白操作步驟

更新時(shí)間:2023-07-12      點(diǎn)擊次數(shù):701

海藻糖酶(TREH)真核蛋白操作步驟:


Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取


1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。


2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;


3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;


4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);


5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。


Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取


1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;


2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;


3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。


4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:


細(xì)胞數(shù)量


Lysis Buffer加入量


107個(gè)


0.5 mL~1 mL


5×106個(gè)


0.2 mL~0.5 mL


5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;


6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);


7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融


硅膠膜DNA離心吸附柱(大提)收集管(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)

硅膠膜離心吸附柱(小提)收集器(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)

硅膠膜離心吸附柱系列(15層膜,小提)

硅膠膜離心吸附柱再生液

生物磁珠2:殼聚糖磁珠

生物磁珠2:巰基磁珠(停產(chǎn))

生物磁珠2:醛基磁珠(停產(chǎn))

生物磁珠2:無(wú)包被磁珠

生物磁珠:氨基磁珠

生物磁珠:硅基磁珠

生物磁珠:環(huán)氧基磁珠

生物磁珠:羧基磁珠

酸洗玻璃珠系列

微量單鏈DNA定量試劑盒核酸電泳套裝

一站式DNA非變性PAGE電泳套裝

一站式DNA尿素-PAGE電泳套裝

一站式miRNA尿素-PAGE電泳套裝

一站式RNA電泳套裝

核酸電泳液

50×TAE電泳液(2500 mL)

RNA電泳液,10×(100 mL)

RNA電泳液,10×(250 mL)

TBE Running Buffer(TBE電泳液,10×)

超快核酸電泳液(干粉)(20 L)

超快核酸電泳液(干粉)(50 L)

核酸電泳液:50×TAE電泳液(250 mL)


聯(lián)系我們

上海帛科生物技術(shù)有限公司 公司地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661 號(hào)24棟   技術(shù)支持:環(huán)保在線
  • 聯(lián)系人:黃先生
  • QQ:2843593679
  • 電話:13564080845
  • 郵箱:2843593679@qq.com

掃一掃 更多精彩

微信二維碼

網(wǎng)站二維碼

主站蜘蛛池模板: 日韩大片一区二区三区| 麻豆高清免费国产一区| 亚洲aⅴ永久无码一区二区三区 | 色婷婷亚洲十月十月色天| 国产三级精品三级在线观看| 97国产精东麻豆人妻电影| 99热精国产这里只有精品| 国产极品美女高潮抽搐免费网站| 天堂资源最新在线| 国产在线综合一区| 国产精品v一区二区三区| 国产又猛又黄一区二区| 亚洲色自偷自拍另类小说| 国产精品亚洲精品久久精品| 业余 自由 性别 成熟偷窥 | 久久久噜噜噜久久熟女| 亚洲成在人网站无码天堂| 久久精品国产免费观看三人同眠| 在线播放国产一区二区三区| 精品国产情侣高潮露脸在线| 精品夜夜澡人妻无码av蜜桃 | 人妻av第一区| 久久国产劲暴∨内射| 国产av一区二区三区天堂综合网| 国产精品欧美亚洲韩国日本久久| 欧美性做爰片免费视频看| 精品无码久久久久久久久久| 黑人巨大精品欧美一区二区奶水| 女人被狂躁c到高潮视频| 午夜爽爽爽男女免费观看麻豆国产| 日本护士xxxxhd少妇| 日本高清无卡码一区二区| 无码专区视频精品老司机| 成人免费无码大片a毛片18| 激情都市亚洲一区| 国产精品亚洲日韩欧美色窝窝色欲| 国产?在线观看免费游戏| 日本久久综合久久鬼色| 欧美老妇与zozoz0交| 国产超高清麻豆精品传媒麻豆精品| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区综合激情电影|